地表水中快速檢測糞大腸菌群的方法

發(fā)布時(shí)間：2022/5/31 15:47:30 來(lái)源：貫奧儀器儀表作者：便攜式多參數水質(zhì)分析儀器閱讀次數：

想要知道地表水是否受到了糞水污染以及污染的程度如何，糞大腸菌群是一項非常重要的參數。因此如何能夠快速、可靠、準確的檢測出糞大腸菌群含量對水質(zhì)健康具有重要意義。

今天我們要講的是通過(guò)光度法快速檢測地表水中糞大腸菌群的操作方法，此方法原理是通過(guò)一定量的水樣與選擇性培養基混合均勻放置于44.5℃環(huán)境下，糞大腸菌群產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，并分解色原底物釋放出色原體使培養基呈現顏色變化，通過(guò)連續分光光度（波長(cháng)：300nm～600nm）測定，依據待測水樣色度變化與水中糞大腸菌群數成一定關(guān)系的原理，得出糞大腸菌群濃度。

采集地表水糞大腸菌群水樣

檢測時(shí)的干擾及消除

1.活性氯具有氧化性，能破壞微生物細胞內的酶活性，導致細胞死亡，可在水樣采集時(shí)加入硫代硫酸鈉溶液消除干擾。

2.重金屬離子具有細胞毒性，能破壞微生物細胞內的酶活性，導致細胞死亡，可在水樣采集時(shí)加入乙二胺四乙酸二鈉溶液消除干擾。

檢測所需試劑

1.糞大腸菌群檢測試劑主要成分：

——蛋白胨：5g；

——硫酸錳：0.005g；

——硫酸鎂：0.001g；

——硫酸鋅：0.001g；

——磷酸鹽：1.78g；

——兩性霉素B：0.60g；

——蒸餾水1000mL。

制法：上述試劑溶于蒸餾水中，充分混勻，調整pH值為7.2～7.4，68.95kPa(115℃)，高壓滅菌20min，分裝貯存于4℃避光備用。也可采用市售商品化培養基制品。

2.硫代硫酸鈉。

3.乙二胺四乙酸二鈉。

4.硫代硫酸鈉溶液：0.10g/mL，

稱(chēng)取15.7g硫代硫酸鈉，溶于適量水中，定容至100mL，臨用現配。

5.乙二胺四乙酸二鈉溶液：0.15g/mL，稱(chēng)取15g乙二胺四乙酸二鈉，溶于適量水中，定容至100mL，此溶液保質(zhì)期為30d。

6.無(wú)菌水：取適量純水，經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min，備用。

檢測所需儀器

1.采樣瓶：具螺旋帽或磨口塞的100mL、250mL、500mL廣口玻璃瓶。

2.微生物快速檢測儀：

——恒溫培養單元：不少于2個(gè)溫控系統，溫度控制精度1℃，可自動(dòng)調節待檢測樣本培養溫度（44.5℃±1℃）；

——檢測單元：不少于4個(gè)獨立的檢測系統，可實(shí)現多個(gè)樣本的同時(shí)監測；

——數據顯示、處理單元：自動(dòng)輸出檢測結果，可查詢(xún)和顯示歷史數據。

3.高壓蒸汽滅菌器：121℃可調、101.3kpa。

4.量筒：50mL、100mL。

5.移液管：1mL、10mL。

6.天平：感量0.01g。

水樣采集與保存

采集方法

點(diǎn)位布設及采樣頻次按照相關(guān)國家標準執行。與其它項目一同采樣時(shí)，先單獨采集微生物樣品，采樣瓶不得用水樣洗滌，采集水樣于滅菌的采樣瓶中。

采集河流、湖庫等地表水樣時(shí)，可握住瓶子下部直接將帶塞采樣瓶插入水中，約距水面10cm-15cm處，瓶口朝水流方向，拔玻璃塞，使水樣灌入瓶?jì)热缓笊w上瓶塞，將采樣瓶從水中取出。如果沒(méi)有水流，可握住瓶子水平往前推。采樣量一般為采樣瓶容量的80%左右。采好水樣后，迅速扎上無(wú)菌包裝紙。

采集地表水、廢水樣品及一定深度的水樣時(shí)，可使用滅菌過(guò)后專(zhuān)用采樣裝置采樣。在同一采樣點(diǎn)進(jìn)行分層采樣時(shí)，應自上而下進(jìn)行，避免不同層次的攪擾。

如果采集的是含有活性氯的樣品時(shí)，需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉溶液，以除去活性氯對細菌的抑制作用(每125mL容積加入0.1mL的硫代硫酸鈉溶液)；如果采集的是重金屬離子含量較高的樣品，則在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉溶液，以消除干擾（每125mL容積加入0.3mL的乙二胺四乙酸二鈉溶液）。